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      大鼠彈性蛋白(ELN)ELISA試劑盒

      產品名稱: 大鼠彈性蛋白(ELN)ELISA試劑盒
      產品型號:
      產品特點: 南京信帆生物供應大鼠彈性蛋白(ELN)ELISA試劑盒 ,提供技術指導和售后服務,質量穩定,提供免費代測服務。信帆生物銷售的試劑盒均采用進口材料生產,具有操作簡單,靈敏度高等特點,咨詢.

      大鼠彈性蛋白(ELN)ELISA試劑盒 的詳細介紹
      產品名稱:大鼠彈性蛋白(ELN)ELISA試劑盒
      英文名稱:Rat ELN (Elastin) ELISA Kit
      規格:48T/96T
      產品保質期:6個月
      保存條件:2-8度
      該試劑盒操作原理:
      本試劑盒含量是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知待測物質濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將待測物質和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中待測物質的濃度呈比例關系
      我們在做ELISA實驗的時候,通常選取血液樣本為我們的代測樣本,具體收集方法如下:
      血液樣本的收集:
      全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
      1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
      2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及枸櫞酸鈉。
      大鼠彈性蛋白(ELN)ELISA試劑盒
      我們在選擇抗凝劑的時候,有幾點需要注意的:
      ①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要*,同時所取的全血的量也要盡量*;
      ②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
      ③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
      ④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
      用于測定。
      組織樣本也是我們經常使用到的,動物組織樣本的前處理,勻漿方法如下:
      動物組織樣本的前處理:
      1、取組織塊(0.1g~0.2g)在冰冷的生理鹽水中漂洗,除去血液,濾紙拭干,準確稱重,放入勻漿管中。
      2、按重量(g):體積(ml)=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質(推薦使用0.86%的生理鹽水)于勻漿管中,冰水浴條件下,用眼科小剪盡快剪碎組織塊。
      3、勻漿的方式有多種:手工勻漿,機器勻漿,超聲粉碎。
      ①、手工勻漿:將玻璃勻漿管置于冰水浴條件下,手動勻漿,30秒/次,間隔30秒,重復6~8次,制成10%的勻漿液。
      ②、機器勻漿:用機械式勻漿機(組織搗碎機或內切式勻漿機),8000~10000轉/分,冰水浴條件下,10秒/次,間隙30秒,連續3~5次。(皮膚、肌肉組織等可延長勻漿時間)
      ③、超聲粉碎:用超聲粉碎機進行粉碎,可用Soniprep150型超聲波發生器以振幅14微米超聲處理30秒使細胞破碎,也可用國產超聲波發生儀,用400安培,5秒/次,間隙10秒反復3~5次。
      鏡檢觀察:取少量組織勻漿作涂片,顯微鏡下觀察細胞是否破碎,若沒有則可延長勻漿時間。
      4、將制備好的10%勻漿液用普通離心機或低溫低速離心機2500轉/分左右,離心10~15分鐘,取上清液進行測定.(測定相應指標的同時需測一下相應樣本的蛋白濃度,總蛋白測試盒本所有售)
      大鼠彈性蛋白(ELN)ELISA試劑盒
      我們銷售的試劑盒的具體操作簡單的特點,具體步驟如下(試劑盒已經包含了所有試劑,自備儀器為酶標儀,洗板機,溫育箱,移液器):
      1. 加樣:標準品設定5個濃度點10個孔,每個濃度設定平行孔,加入50微升不同濃度的標準品,空白孔設定1個孔加入50微升蒸餾水(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔,在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
      2. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
      3. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
      4. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
      5. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
      6. 溫育:操作同3。
      7. 洗滌:操作同5。
      8. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
      9. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
      10. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
      大鼠彈性蛋白(ELN)ELISA試劑盒
      我們銷售的試劑盒性能穩定:
      試劑盒性能我們是通過幾個數值反應的:1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990以上。2.批內與批間分別小于9%和11%
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